DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I,地高辛检测试剂盒,DIG High Prime

地高辛检测试剂盒 DIG-High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I

货号: 11745832910

罗氏科学应用部（Roche Applied Science）是*早致力于向用户提供非放射标记技术的公司之一，让更多的科研工作者们可以避免使用危险的放射性同位素。自1995年罗氏**的地高辛产品上市以来，尽管陆续有许多出色的竞争者涉足这一领域，尽管有定量PCR技术的应用，DIG系统仍然是非放射性高效标记—检测技术的优选，被广泛地应用各种膜杂交及原位杂交技术中。 

技术原理： 

    地高辛标记技术源于一种从洋地黄类植物（毛地黄和毛花毛地黄）中提取的类固醇（Steroid）物质—— Digoxigenin （DIG），在医学上可用于**各种急性和慢性心功能不全以及室上性心动过速、心房颤动和扑动等**。由于洋地黄植物的花和叶片Digoxigenin在自然界中的**来源，因此抗DIG的抗体不会与其他的生物物质结合，从而可以满足特异性标记的需要。这一点，正是DIG胜于生物素(Biotin)的地方——同样是小分子标记物，生物素广泛存在于各种组织中，对于灵敏度很高的标记检测实验来说，样品自身含有的内源生物素，就会对结果产生干扰。地高辛就能够很好地避免这个问题。

技术特点：

与放射性标记和检测技术相比较，DIG 系统具有一下多个优势：

è高灵敏度，完全可满足实验需要，某些方面甚至可与放射性标记的灵敏度向媲美

è曝光时间短，结果显示时间以分钟计算，无需几小时甚至几天的自显影过程

è**环保，不接触放射性物质，不会对环境造成污染

è探针可重复使用，*少可以稳定储存一年

è可轻松进行探针拨离和重探

è凭借多年的经验和众多使用者的反馈意见，提供**的应用指南

应用领域：

地高辛系统能够**高效地标记DNA, RNA或是寡聚核苷酸探针，这些探针可以被广泛地应用在

èSouthern blotting, dot blotting

èNorthern blotting

èArray

èColony hybridization

èIn situ hybridization

èELISA

技术细节：

    DIG 通过一个含有11个碳原子的空间臂与尿嘧啶核苷酸上的C5位置相连，一定浓度的DIG标记的核苷酸可以通过DNA polymerase(如E.coli DNA Polymerase, T4 DNA Polymerase, T7 DNA Polymerase, Reverse Transcriptase, Taq DNA Polymerase ）、RNA polymerase (如SP6, T3或T7 RNA Polymerase)或是末端转移酶（Terminal Transferase）的作用掺入到核苷酸探针中；也可通过随即引物标记（random primed labeling）, 缺口平移（nick translation），PCR，3’端标记/加尾或是体外转录制备带有DIG标记的探针。当然也可以通过化学合成的方法进行核苷酸的标记。

Fig. Structure of Alkali-liable Digoxigenin(DIG)-dUTP

    对于DIG 标记探针的杂交检测，可选用连接有碱性磷酸酶（alkaline phosphatase），过氧化物酶(peroxidase),荧光素（fluorescein）,若丹明（rhodamine）或是胶体金（colloidal gold）高亲和性的抗DIG抗体共轭物；也可选用不带任何共轭连接的抗DIG抗体和二级抗体。

    检测的灵敏度主要依赖于对不同抗DIG抗体共轭物显示方法的选择。以连接有碱性磷酸酶的抗DIG 抗体为例：即可以使用NBT或BCIP做底物的显色法，也可以使用HNPP荧光碱性磷酸酶底物，检测的灵敏度常规可达到0.1pg (Souther blot)。

产品留言

标题

联系人

联系电话

内容

验证码

点击换一张

注：1.可以使用快捷键Alt+S或Ctrl+Enter发送信息!
2.如有必要,请您留下您的详细联系方式!