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　　人非小细胞肺癌细胞 【培养指南】

　　人非小细胞肺癌细胞属于贴壁型细胞，如果漂浮的死细胞多，说明细胞有很多老化的，建议每次传代的时候，在用胰酶消化之前，*好用PBS将细胞漂洗一遍，胰酶消化的时间要把握好，37℃2-3min即可，及时终止反应，否则胰酶消化过度对细胞损伤较大，也会有很多死细胞出现的;吹打细胞的动作要轻柔。

　　人非小细胞肺癌细胞 【细胞冻存】

　　待细胞生长状态良好时，可进行人非小细胞肺癌细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

　　人非小细胞肺癌细胞 【复苏的原则】

　　快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使人非小细胞肺癌细胞|细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。

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