Sigma D5025 Deoxyribonuclease I ≥2000 KU/mg,DNase I,脱氧核糖核酸酶I

脱氧核糖核酸酶Ⅰ

英文名: DNase I，Deoxyribonuclease I

中文名称: 脱氧核糖核酸酶I

说明: 脱氧核糖核酸酶I是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物，5'端为磷酸基团，3'端为羟基。
  DNase I活性依赖于钙离子，并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。
特点：不含RNase(RNase free)，可以用于各种RNA样品的处理。提供了用于DNase I失活所需的EDTA。
用途：制备不含DNA的RNA样品；RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污染；体外T7, T3, SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后去除DNA模板； DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用；缺口平移(nick translatioin)；产生DNA随机片断文库；细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。
来源：从牛胰腺纯化得到。
分子量：约32kDa(单体)。

活性定义：37℃10分钟内，将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，10mM MgSO₄，1mM CaCl₂，1μg of pBR322 DNA。
 纯度：不含其它DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
 酶储存溶液：50mM Tris-acetate(pH7.5)，10mM CaCl₂，50%(v/v)glycerol。
 Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃)，25mM MgCl₂，1mM CaCl₂。
 失活或抑制：加入EDTA至终浓度为2.5mM后，65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子，0.1%的SDS，DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。

保存条件：-20℃保存。
注意事项：  如需对酶进行稀释，可以用酶储存液(50mM Tris-acetate(pH 7.5)，10mM CaCl₂，50%(v/v)glycerol)进行稀释。

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Sigma D5025 Deoxyribonuclease I from bovine pancreas

Type IV, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 Kunitz units/mg protein

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